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图3显示了重组溶瘤腺病毒rad-ifn-3-sp-e1a(δ24bp)-e1b在裸鼠移植瘤模型中对**生长的抑制作用。其中,辽宁推荐溶瘤病毒检测值得推荐,图3a显示了sw620裸鼠移植瘤体内模型的结果,图3b和c显示了mda-mb-231裸鼠移植瘤体内模型的结果;图3d和e显示了hcc827裸鼠移植瘤体内模型中的结果。图4显示了重组溶瘤腺病毒rad-ifn-3-sp-e1a(δ24bp)-e1b在人源化*系统小鼠移植瘤模型中对**生长的抑制作用,辽宁推荐溶瘤病毒检测值得推荐。其中图4a和b显示了对给药侧(右侧)**的抑制效果,图4c和d显示了对非给药侧(左侧)**的抑制效果。图5显示了重组溶瘤腺病毒rad-ifn-3-sp-e1a(δ24bp)-e1b防止**复发的效果。图5a显示了在hcc827裸鼠移植瘤体内模型中经过注射rad-ifn-3-sp-e1a(δ24bp)-e1b后消退的小鼠体内重新移植hcc细胞后的效果,与对照(pbs)组的比较。图5b显示了实验组不同小鼠个体的**变化数据;图5c为实验组与对照组中小鼠**终**体积的统计学比较,辽宁推荐溶瘤病毒检测值得推荐。具体实施方式定义除非另外定义,在此使用的所有技术和科学术语具有与本发明所属领域的普通技术人员通常所理解的相同的含义。所有在此提及的出版物引入本文作为参考,以用于描述和公开在所述出版物中所报道的细胞系、载体和方法,其可用于本发明。在此没有任何事物可被认为承认了。迈杰转化医学病理检测平台配备有Roche/Leica/Dako等多种全自动检测仪器,有病理医生进行精确的判读。辽宁推荐溶瘤病毒检测值得推荐
约5倍)的抗病毒、抗增殖和***nk细胞的活性。一种示例性的复合干扰素例如干复津,参见美国**us4695623和us4897471中所公开的序列。本公开可以使用现有技术中已知的干扰素序列,在一个推荐的实施方案中,本公开使用了复合干扰素。申请人经过深入研究后发现,选择合适的核酸编码序列会影响干扰素蛋白在体内的***效果。针对同一个干扰素蛋白,例如复合干扰素,当溶瘤病毒载体中携带不同的干扰素核酸编码序列时,溶瘤病毒体内溶瘤效果会具有不小的差别。并且申请人发现这种效果的差异与生物体密码子的偏好性无关,即这种效果的差异并非由是否采用**适合于人体表达的密码子而导致的。在一个实施方案中,使用了适合原核表达的密码子(例如seqidno:4所示的ifn-3序列),同样获得了优异的技术效果,获得了预料不到的技术效果。辽宁推荐溶瘤病毒检测共同合作迈杰转化医学可以提供覆盖肺ai、肠ai、肝ai、胃ai、乳腺ai、**腺ai等多种实体瘤的上百项检测项目。
3)质粒转染和病毒包装按照effectenetransfectionreagent转染试剂盒的说明书进行,取1μg步骤(2)中经过线性化的重组质粒pad-ifn-3-sp-e1a(δ24bp)-e1b,将其转染入步骤(1)得到的铺在6孔板中的hek-293细胞。约7-10天后细胞完全病变,此时收集病毒液,于-80℃中保存备用。4、重组病毒rad-ifn-3-sp-e1a(δ24bp)-e1b的滴度测定病毒滴度测定的原理是依据*细胞化学法统计hexon染色阳性的细胞数来判定具有***活性的病毒数量,根据腺病毒滴度试剂盒上的说明书对小扩和纯化后的腺病毒测定滴度。5、结晶紫法检测溶瘤病毒的安全性将细胞铺于24孔板,***后用适当moi的待测重组腺病毒***细胞,37℃继续培养4天后弃培养基,每孔加入500μl结晶紫染色液(2%结晶紫溶于20%甲醇溶液),染色30min,在净水中将多余的染液洗净,晾干后拍照。6、体内药效试验sw620细胞裸鼠成瘤模型实验裸鼠达到6周龄,注射1×106个sw620**细胞进行成瘤实验,经测量后发现**大小在80-100mm3左右且体质健康良好时,将小鼠随机分成3组,即pbs组、rad-ifn-3-sp-e1a(δ24bp)-e1b组和ad-ifn-3-sp-e1a(δ24bp)-e1b组,均采用瘤内注射的方式,剂量为×1010vp/只/次,每隔1天注射一次,共4次。每隔3天观察并测量**大小。
溶瘤病毒是一种可编程的“活药”溶瘤病毒是一种可编程的“活药”,可以通过多种路径来杀伤**,有效避免耐药性。目前认为溶瘤病毒杀伤**主要有三方面作用机制:(1)在**细胞中特异繁殖,直接裂解*细胞。一直到2000年左右,科研人员还大多以为这是病毒杀伤**的主要方式,溶瘤病毒被认为是一种单纯的病毒疗法,相关工作也都集中在提高病毒裂解效率和**细胞选择性上。(2)2000年后,科研人员才逐渐发现,病毒可以通过多种途径(增加**抗原暴露、调节**微环境、增加**微环境*细胞浸润、活化*细胞、通过携带的*调节因子刺激机体*系统等)来诱导全身系统的抗***反应来杀伤**。因此,溶瘤病毒疗法已经从一种单纯的**病毒疗法归类为一种新型的******药物,基因改造思路也发生变化,比如,开始在溶瘤病毒基因组中加入一些*调节因子的基因(如T-vec的GM-CSF)。(3)另外,还有报道表明,有些病毒可以通过*****相关的血管内皮细胞,阻止**血管生成,导致**细胞坏死而间接杀死**细胞。此外,溶瘤病毒还可以做多种改造,作为载体插入***性基因,通过多种途径协同作用杀伤**细胞,可以有效避免目前单一靶点抗*药物普遍存在的耐药性问题。【迈杰转化医学】一直以来致力于转化医学服务和伴随诊断产品开发及商业化。
ctgatgaacgttgactccatcctggctgttaaaaaatacttccagcgtatcaccctgtacctgaccgaaaaaaaatactccccgtgcgcttgggaagttgttcgtgctgaaatcatgcgttccttctccctgtccaccaacctgcaggaacgtctgcgtcgtaaagaataa(seqidno:4)。本文使用的术语“药物组合物”表示组合在一起以实现某种特定目的的至少一种药物以及任选地可药用载体或辅料的组合。在某些实施方案中,所述药物组合物包括在时间和/或空间上分开的组合,只要其能够共同作用以实现本发明的目的。例如,所述药物组合物中所含的成分可以以整体施用于对象,或者分开施用于对象。当所述药物组合物中所含的成分分开地施用于对象时,所述成分可以同时或依次施用于对象。推荐地,所述药学上可接受的载体是水、缓冲水溶液、等渗盐溶液如pbs(磷酸盐缓冲液)、葡萄糖、甘露醇、右旋葡萄糖、乳糖、淀粉、硬脂酸镁、纤维素、碳酸镁、%甘油、透明质酸、或聚亚烷基二醇如聚丙二醇、甘油三酯等。所用可药用载体的类型尤其依赖于根据本发明的组合物是否配制为用于经口、鼻、瘤内、灌注、皮内、皮下、肌内或静脉施用。根据本发明的组合物可包含润滑剂、防腐剂、稳定剂、湿润剂、乳化剂、影响渗透压的盐、缓冲剂、着色物质、矫味物质和/或芳香物质等作为添加剂。迈杰转化医学为客户提供生物标记物发现、 靶点验证、伴随诊断开发与商业化、患者用药指导等一体化解决方案。辽宁推荐溶瘤病毒检测共同合作
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本发明没有位于依据在前发明的此类公开内容之前的权利。术语“溶瘤病毒”是指能够在*症或者具有过度增殖的细胞中选择性复制,从而减缓其生长或者使其死亡的病毒,同时对正常细胞没有影响或影响很小。示例性的溶瘤病毒包括水泡性口炎病毒(vsv),新城疫病毒(ndv),单纯疱疹病毒(hsv),呼肠孤病毒,麻疹病毒,逆转录病毒,流感病毒,辛比斯病毒,痘苗病毒和腺病毒等(参见,例如,kirn等,:781)。(2001);coffey等,science282:1332(1998);lorence等,:6017(1994);和peng等,blood98:2002(2001))。”术语“干扰素”指由多种真核细胞在暴露于各种不同的环境刺激(包括病毒***或者接触促细胞分裂原)后产生的分泌型蛋白质家族。除了具有抗病毒特性以外,干扰素还显示出影响多种细胞功能。三种主要的干扰素是ifn-a、ifn-β和ifn-γ。干扰素**初是根据其细胞来源(白细胞、纤维原细胞或t细胞)来分类的。白细胞干扰素目前称为ifn-α,纤维原细胞干扰素为ifn-β,t细胞干扰素为ifn-γ。术语“复合干扰素(consensusinterferon)”指一种合成干扰素,其氨基酸序列是所有已知人α干扰素亚型的大致平均的序列。已经报道了,复合干扰素具有比任何**人ifn-α亚型更好。辽宁推荐溶瘤病毒检测值得推荐
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