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h1)str分型;(h2)y-str分型;(h3)个体识别;(h4)亲权鉴定;(h5)种族推断。本发明还保护上述任一所述引物组合或上述任一所述复合扩增体系的应用,可为(h1)-(h5)中的至少一种:(h1)str分型;(h2)y-str分型;(h3)个体识别;(h4)亲权鉴定;(h5)种族推断。上述任一所述68个基因座具体可由amelogenin、dys19、dys385a/b、dyf387s1a/b、dys388、dys389-i、dys389-ii、dys390、dys391、dys392、dys393、dyf399s1、dyf404s1a/b,浙江提供迈杰转化医学NGS平台郑重承诺、dys437、dys438、dys439、dys443、dys444、dys446、dys447、dys448,浙江提供迈杰转化医学NGS平台郑重承诺、dys449、dys456、dys458、dys459a/b、dys460、dys481、dys485,浙江提供迈杰转化医学NGS平台郑重承诺、dys504、dys505、dys508、dys510、dys518、dys520、dys522、dys527a/b、dys531、dys533、dys549、dys552、dys557、dys570、dys576、dys587、dys593、dys596、dys612、dys617、dys622、dys626、dys627、dys630、dys635、dys641、dys643、dys644、dys645、dys710、dys720、y-gata-a10和y-gata-h4组成。其中,amelogenin为性别决定基因座。dyf399s1包含三个分型片段。dys385a/b、dyf387s1a/b、dyf404s1a/b、dys459a/b和dys527a/b均包含两个分型片段。本发明提供的试剂盒可以检测68个基因座。迈杰与大学,研究院所,医院的科研人员进行科研转化研究合作,包括基础科学研究及临床应用研究等。浙江提供迈杰转化医学NGS平台郑重承诺
1977年,WalterGilbert和FrederickSanger发明了***台测序仪,并应用其测定了***个基因组序列,噬菌体X174,全长5375个碱基。由此开始,人类获得了探索生命遗传本质的能力,生命科学的研究进入了基因组学的时代,到至今为止的四十年时间内,测序技术已取得了相当大的发展,从***代发展到了*三代测序技术。Sanger所发明的测序方法被称为***代测序技术,该技术直到现在依然被***使用,但是其一次只能获得一条长度在700~1000个碱基的序列,无法满足现代科学发展对生物基因序列获取的迫切需求。高通量测序(High-ThroughputSequencing,HTS)是对传统Sanger测序的革命性变革,其解决了一代测序一次只能测定一条序列的限制,一次运行即可同时得到几十万到几百万条核酸分子的序列,因此也被称为新一代测序(NextGenerationSequencing,NGS)或*二代测序。*二代测序技术虽然测序的通量**增加,但是其获得单条序列长度很短,想要得到准确的基因序列信息依赖于较高的测序覆盖度和准确的序列拼接技术,因此**终得到的结果中会存在一定的错误信息。因此,科研人员又发明了*三代测序技术也称为单分子测序技术,该技术在保证测序通量的基础上,对单条长序列进行从头测序。 安徽专注迈杰转化医学NGS平台服务至上迈杰转化医学具备从样本制备到H&E,IHC、FISH、RNAscope及多重*组化等全套组织病理和分子病理检测能力。
本发明涉及生物技术领域,特别涉及二代测序文库构建技术。背景技术:二代测序由于其**高的测序能力在科研和临床中具有较为重要的应用。二代测序技术也称深度测序、大规模平行测序,**思想是边合成边测序(SequencingbySynthesis),即通过捕捉新合成的末端的标记来确定DNA的序列,现有的技术平台主要有Roche/454FLX、Illumina/SolexaGenomeAnalyzer和AppliedBiosystemsSOLIDsystem。这三个技术平台各有优点,454FLX的测序片段比较长,高质量的读长能达到400bp;Solexa测序性价比**高,不*机器的售价比其他两种低,而且运行成本也低,在数据量相同的情况下,成本只有454测序的1/10;SOLID测序的准确度高,原始碱基数据的准确度大于%,而在15×覆盖率时的准确度可以达到%。Illumina/SolexaGenomeAnalyzer测序的基本原理是边合成变测序。在Sanger等测序方法的基础上,通过技术创新,用不同颜色的荧光标记四种不同的dNTP,当DNA聚合酶合成互补链时,每添加一种dNTP就会释放出不同的荧光,根据捕捉的荧光信号并经过特定的计算机软件处理,从而获得待测DNA的序列信息。二代测序的一般流程如下:1)文库制备,将DNA用雾化或超声波随机片段化成几百碱基或更短的小片段。
包括67个y-str基因座和1个性别决定基因座amelogenin)。相比于illumina公司的forenseqtmdnasignatureprepkit,本发明提供的试剂盒中包含41个新的y-str基因座,能提供更多新的遗传信息。而且本发明提供的复合扩增体系中所有y-str基因座的**大扩增子长度都小于300bp,而forenseqtmdnasignatureprepkit中有约%(7/24)基因座的**大扩增子长度大于300bp,不利于降解检材的分析。本发明提供的试剂盒是本发明的发明人经过大量实验摸索获得的,试剂盒中的引物具有不可替换性;即引物被替换后,部分基因座将会被抑制且抑制效果不可预知。实验证明,采用本发明提供的试剂盒检测标准品2800m中68个基因座的str分型,分型结果准确。本发明具有重要的应用价值。附图说明图1为67个y-str基因座的pcr扩增产物的长度范围分布。具体实施方式以下的实施例便于更好地理解本发明,但并不限定本发明。下述实施例中的实验方法,如无特殊说明,均为常规方法。下述实施例中所用的试验材料,如无特殊说明,均为自常规生化试剂商店购买得到的。以下实施例中的定量试验,均设置三次重复实验,结果取平均值。标准品2800m为promega公司的产品,产品目录号为dd7251。 覆盖多个主流IHC自动染色平台,适用范围广。
02FGFR通路的异常调控FGF/FGFR通路的异常调控由多种因素介导,包括:基因改变(扩增、突变和染色体易位);自分泌和旁分泌信号;血管生成以及上皮间质转化(EMT),进而促进细胞增殖、上皮间质转化和血管生成,并推动**的发***展、侵袭、转移等(图2),其中主要的三种调控途径为:a.FGFR基因扩增导致的蛋白过表达;b.***性突变,该突变通常会导致配体亲和力的提高或受体二聚化的增加及活化(配体不存在的情况下),或激酶结构域的组成性***;c.由染色体易位导致的基因融合。图2FGFR异常调控的致*机制[5]图2FGFR异常调控的致*机制[5]03FGFR异常形式以及在不同**中的分布FGFR常见变异形式包括基因扩增/过表达、***突变、基因融合等,此外还有重排、激酶结构域重复及自分泌***等。FGFR的异常表达已在多种实体瘤肿中检测到,如过表达常发生在肺*、脑*、头颈*、**腺*等,融合常发生在骨髓增生综合征、T细胞淋巴瘤、膀胱*和肝内胆管*等(表1)。迈杰多平台的研究优势以及多组学数据的挖掘能力,促进产学研医结合,加速项目成果转化,创新科技产品研发。浙江提供迈杰转化医学NGS平台郑重承诺
迈杰转化医学具有多年伴随诊断服务经验,获得CNAS国际实验室认可,美国CAP认证。浙江提供迈杰转化医学NGS平台郑重承诺
三代测序简介1、HelicoBioScience2008年4月,HelicoBioScience报道了单分子测序技术,读取单分子荧光的能力,是***家商业化单分子测序技术的公司,但仪器过于较贵,数据质量较差,于2010年停止运营。2、PacificBiosciences单分子实时技术(singlemoleculerealtime,SMRT)利用单分子技术和DNA聚合酶,在聚合反应的同时就可以读取测序产物,在测序速度、读长和成本方面有着巨大的优势和潜力,但目前读取速度偏低。以对单分子DNA进行非PCR测序为主要特征(二代测序平台基于PCR扩增的信号放大过程),长读长,实时,单分子等,但三代测序基于单分子酶学或者单分子电学,信号容易丢失,通量不高,单碱基的测序成本也居高不下。目前主要有RSII和sequel两款测序仪。3、纳米孔测序OxfordNanopore:纳米孔测序的原理可以简单地描述为:单个碱基通过纳米尺度的通道时,会引起通道电学性质的变化。理论上,A、C、G、T四种不同的碱基由于化学性质的差异,它们穿越纳米孔时引起的电学参数变化量也有差异,检测这些变化量,即可得到相应碱基的类型。 浙江提供迈杰转化医学NGS平台郑重承诺
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